Miten kasvaaloisen Apicoplast solutKulttuuri

Apicoplasts ovat eräänlainen solunsisäisen organelle läsnä yksisoluisia loisia , jotka aiheuttavat vakavia sairauksia, kuten malaria , toksoplasmoosi ja kokkidioosia . Soluelimiin ovat monimutkaisia ​​rakenteita solun sisällä , joka ei voi kasvaa ja lisääntyä itse . Ne ovat syntyneet , kunesiloisten nielaisi toisen organismi , joka liittyi luultavasti punalevää . Koska apicoplasts eivät ole riippumattomia soluja , niitä ei voida kasvattaakulttuuri itse . Kasvattaa ne yksi tarvitsee kasvaakseenloisia . Seuraavassa esitetään ohjeet kulttuuripunasolujen vaiheessa Plasmodium falciparum , joka aiheuttaa malaria.Things tarvitset
Parasite
RPMI 1640- viljelyväliaine
laminaarivirtausvetokaapissa
Autoklaavi
Albumax II seerumin korvike
D - glukoosia
Hypoxantine
HEPESiä
gentamisiinisulfaatti
dosviljelmäpulloissa
soluinkubaattorissa
Punasolujen
Näytä enemmän Ohjeet
viljellään Plasmodium falciparum
1

Aseta soluinkubaattorissa 37 Celsius-astetta ja säätääkaasun koostumus 1 prosenttiin happea , 3 prosenttia hiilidioksidia , ja 96 prosenttia typpeä .
2

Autoklaavi kaikki ei - steriilit laitteet ja materiaalit.
3

Työskentelylaminaarivirtauskaapissa steriiliyden laadittava lopullinen keskipitkällä lisäämälläseuraavatRPMI 1640 väliaine:

D - glukoosia lopulliseen pitoisuuteen 20 mM .

Hypoxantine lopulliseen pitoisuuteen 0,2 mM .

HEPES lopulliseen pitoisuuteen 25 mM .

gentamisiinisulfaattia lopulliseen pitoisuuteen 25 mg /L.

Albumax IIloppupitoisuudeksi 0,5 prosentin paino /tilavuus
4

Levitetään kokonaismäärä väliaineen tehty edellisessä vaiheessa niin moneen dosviljelmäpulloissa kuin halutaan ja aseta neshakeryrityshautomo .
5

Kunkeskipitkän on saavuttanut 37 astetta , lisääloinen varastossa .
6

muutaviljelyalustasta joka päivä pitääloiset hyvin ruokittu ja elossa .
7

Lisää punasoluja joka toinen päivä . Ne tartunnanuusia loisia , joita syntyykulttuuria . Jos he tulevat liian montapulloon , jakaa sen sisällön kahteen tai useampaan kappaleen.